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发布时间:2020-03-11 07:55:21
RCCS旋转三维细胞裴炎系统的特点?
作为一种更***的替代方法,三维(3D)的细胞培养方法,研究人员提供研究细胞生长和分化的条件下,更加紧密地在体内的情况类似,细胞形态和细胞环境方面的可能性。目前,三维培养模式正在生物***研究的许多领域开始应用,因为他们提供了比2D培养模式一个更接近体内的环境。2D培养技术的时代正在走向新时代的培养系统在3D。
RCCS旋转三维细胞培养系统的特点主要:
1、允许在一个三维空间的球体内共培养多种细胞
2、容器(存储营养液及细胞)在旋转时仅有较小的剪切力,因此导致的湍流非常小,便于细胞增殖
3、具有高营养素传质特点,可预防细胞***
4、容器转速可通过转速表进行任意调整
细胞培养不仅是一种技术,也是一门科学,现已在现代***和生物科学研究中广泛应用
细胞培养不仅是一种技术,也是一门科学,现已在现代***和生物科学研究中广泛应用,这与其一系列优点是分不开的:
(1)可简化细胞的生长环境。生物体内任何一个细胞不论是其生存环境还是其发挥功能的条件等都是非常复杂和不易研究的,要想了解某一种细胞的生存条件和生物学功能,一个有效的方法就是将所研究的对象孤立出来单独分析。美国赛斯康Synthecon 3D***三维培养系统RCCS-SC培养仪细胞培养技术使得在细胞存活的基础上***研究细胞生命活动、逐项研究细胞生存条件和细胞功能成为可能。
(2)能够方便地控制实验因素。在细胞培养的条件下,细胞生存的理化环境如pH、温度、CO2张力等都是可以人为控制的,并且可能做到很精1确以及保持其相对的恒定。研究某种实验因素对细胞的生物学作用,只需在培养液中有针对性地加入或者删除这种成分即可。
(3)易于观测实验结果。利用细胞培养技术研究细胞的生命活动规律,可以很方便地采用各种实验技术和方法来观察、检测和记录。例如:通过倒置相差显微镜等直接观察活的细胞;应用缩时电影技术、摄像或者通过闭路电视长时间连续记录和观察被培养细胞的体外生长情况,可以直观揭示培养细胞的生命活动规律以及所施加因素的反应;利用同位素标记、******等方法检测细胞内的物质合成和代谢变化等。
美国Synthecon赛斯康RCCS-1H单转头微重力三维细胞培养系统
细胞传代的一般方法?
开始细胞传代前,仔细检查细胞传代所需的仪器和***是否齐全:一般主要有:细胞(单层细胞,镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH 培养液或MEM 培养液或199 等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血X清、庆大***溶液(1 万单位)、7.5%NaHC03 溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS 洗液。
用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1)、细胞吹打管(20 ml)(以上用具需经121℃至
少15 分钟高压灭菌)、C02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、—20℃冰箱
操作步骤:镜检细胞,挑选生长状态良好,细胞界限清晰,具有立体感,形态好无污染、无异常及可X疑病变细胞。配制细胞培养液:按以下配比配制MEM-0.2%LH 培养液100ml 内,加入灭活小牛血X清10m1,庆大***溶液0.3m1,7.5%碳酸氢钠溶液3ml。(仅供一般参考)。消化细胞;先用PBS 洗液冲洗细胞表面1-2 次,每次10m1,弃去洗液,向细胞瓶内加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,细胞瓶平放,使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1 细胞培养液吹打分散细胞,按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中,再加入10m1 细胞培养液重复吹打一次后分装,然后补加至所需培养量。加塞,置于37±1℃孵箱培养。约2~4 天成片。(由细胞接种浓度决定);填写传代记录。
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