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发布时间:2020-04-14 20:07:24
RCCMAX灌注式旋转细胞培养系统介绍
RCCMAX 属于灌注式旋转细胞培养系统,用户模拟微重力环境下的细胞三维培养应用!1培养液100%充满培养容器,避免了运动中液体湍流的产生和气泡的产生,从而避免了液体湍流或气泡对细胞的正常生长的影响。该系统的特点是通过可控流速的模块以及特殊材质制作的氧合器将未使用的新鲜的培养液按照设定的流速灌入旋转的反应容器内位生长在其中的细胞提供充足必要的养分,并自动回收至回收的培养液瓶中!这种系统,可适用于长时间的细胞或***的培养工作!
NASA工程师开发了在地球上提供“模拟微重力”的旋转壁容器(RWV)生物反应器。 装置的旋转运动抵抗重力以将细胞保持在“模拟微重力”环境中。与之相比,经过优化设计的工程***不但可以很好地满足临床的需要,而且常常不需要长期的、昂贵的术后治X疗,从而大大地降低了医X疗费用,符合现代医X疗体制对医X疗费用进行控制的要求。 在这些条件下,在旋转壁血管内生长的细胞聚集在一起形成与3D***结构相当的3D多细胞结构或团块,如果不同的细胞类型一起培养,甚至更多(7)。 该装置在1993年工业生产,并且因为许多人已经对用RWV获得的3D培养物进行了重要研究。
很快研究不是专门集中在微重力或力减少,重力矢量方向和超重力也是重力作为重力的增量重要。
大多数这些培养实验是在半固体(凝胶)培养基中开发的; 然而,具有液体水基介质的生物反应器在微重力方面显示出另外的问题,介质在任何内壁表面上扩散,生活在空气的中心气泡中,或者介质从壁移除而形成大的中心液滴,到没有介质的***内表面。而微重力旋转细胞培养系统RCCS作为新型的培养技术其主要优点之一是生长于其中的细胞分化或模拟的***结构培养物能够继承双亲细胞的遗传物质,研究者可以得到与接种培养物完全相同的细胞混合物。 此外,在微重力条件下,烧瓶中气体和液相之间的气体扩散不稳定。在1997年大肠杆X菌巴贝拉-纪莲博士开发的***个细胞培养装置没有内部气相,所述的OptiCell的基础上,使用呼吸膜(的控制的气体扩散膜 )(4)这些装置避免所提到的空间的细胞培养的问题,并被NASA迅速采用,并且仍然用于许多空间生物实验(5)(6)。
从1993年到1996年,微重力三维细胞培养系统,科学家与瑞典空间局合作,宁波市微重力细胞培养,在空间研究了重力对非洲爪蟾早期发育的作用,表明在受精期间短时间的微重力和开始的几分钟的发展导致异常的轴形成。RWVB(RCCS-3D)微重力三维培养系统1990年,Kleis等人首先研制了一种生物反应器,随后美国***航空与宇宙航行局(NASA)对此进行改进研制了RWVB即转壁式生物反应器,并应用到***培养领域。 在抛物线飞行火箭内添加特殊的离心机可以区分飞行扰动和实际微重力的影响,显示在微重力中受精的卵产生了囊胚的形态变化,但是这些胚胎***并***了地球的正常发育(8) 。 这些结果表明,需要更长的微重力才能真正地揭示对发展过程的影响。
在20世纪90年代中期,哥伦比亚航天局进行了多次生物实验,包括细胞培养,其中大多数在地球上制备,但在船员控制下在太空飞船上发育。3、随机化的重力向量(randomizedgr***itationalvectors)可能直接影响***表达,或间接促进细胞自分泌/旁分泌,有利于细胞间信号转导。 由于这些实验所需的专门技能和船员的任务超载,仪器被开发以自动执行大多数任务,并从地球控制,如用于***受精的柱塞盒(9),用于***细胞的通用细胞激X活***盒1和2微重力环境(10)和骨X髓细胞成熟研究(11)。
1998年11月,美国航天局与俄罗斯空间计划合作启动国际空间站(ISS)的装配,仅仅五年后,轨道实验室开始真正的科学操作,包括细胞生物学研究,开辟轨道环境研究的有前途的未来12)。
在2008年初,欧洲哥伦布实验室组装到携带Biolab模块的ISS,其设计用于支持生物实验,包括失重在细胞和***培养中从单细胞到复杂细胞结构的作用。 基于这些机会,正在开发用于小卵孵化,植物培养或支持昆虫物种的特定硬件。
***近,为了扩大研究机会和能力,已经整合了细胞培养单位,以及用于啮齿动物的高X力,通信链路和对栖息地的冷却。 栖息地将为各种研究生物提供食物,水,光,空气和废物管理以及湿度和温度控制。 常见的实验室设备如显微镜,低温冷冻器,辐射剂量计和质量测量装置也可以由ISS或地球上的船员操作,科学家将能够发送命令到实验室设备和监测环境和特定栖息地内的实验参数(12,13,14,15) 由于这些实验室已经到位,已经开发和验证了许多“地球”仪器来模拟地球的空间条件,扩大研究情景以及这些特殊条件应用于医X药和工业的可能性。Kinoshita等[14]将骨祖细胞接种于三维网状胶原支架内复合培养,12周后检测发现骨祖细胞在该状态下出现良好的增殖分化表现,形成了类似于正常骨***的结构。 空间实验设置的主要属性是力接近零; 因此使用离心机允许增加和重定向载体,使细胞培养物在强度和方向上暴露于不同的力。 这些领域的研究带来了关于***系统细胞行为在微重力环境结合定向向量力(12)使用远程控制细胞培***物反应器(Techshot,多标本可变重力平台)的重要数据。 也已经在***工程中模拟微重力的可能应用中的重要发现(17)。 自由落体技术已经实施了PetakaG3缺氧minichamber,微重力细胞培养仪,以产生微重力像3D细胞聚集在地球上。
RCCS-3D旋转微重力三维细胞培养系统与传统静态培养系统对比?
传统静态细胞培养是在培养瓶或皿中进行的 。细胞或***均生长在二维平面空间并接触玻璃或塑料表面,3d微重力细胞培养仪,这样的方式会影响细胞中***的表达且无法持续生长及分化。“RCCS-3D旋转微重力三维细胞培养系统与传统静态培养系统对比?”同时平面培养的细胞还会发生“去分化”(dedifferentiation)现象,使培养的细胞逐渐失去其来源***的许多生理特征。与之相比,经过优化设计的工程***不但可以很好地满足临床的需要,而且常常不需要长期的、昂贵的术后治X疗,从而大大地降低了医X疗费用,符合现代医X疗体制对医X疗费用进行控制的要求。而大部分动态培养系统中, 细胞或***是有物理的外力而悬浮的, 有许多包括液态剪切力在内的因素会导致细胞及***损伤。旋转的目的是要让所有细胞均匀交换养分和气体,并且细胞和细胞之间可有足够的接触 ,有利于细胞聚集。另外不论是培养盘或培养管柱背侧均具备硅胶制成的换气膜以利进行X气体交换,使细胞、***得到充分氧气及排除代谢后的废气 。
生长其中的细胞或***是以自由落体的状态悬浮,没有搅拌器、气泡等***性力,故***在培养液中得以自由降落、翻转并与培养液充分混合,其容器内各方向的力量达到平衡,所以细胞、***不会受到单一方向的力影响,可朝任意方向均匀生长,是目前唯X一可使细胞自由生长分化,增加细胞增殖速率,减少细胞***和有效增加细胞产物分泌的系统。2材质透明度高,适用于通过显微镜等工具对培养容器内部进行实时观察。且相比其他的三维细胞培养系统,RCCS系统可以克服长期困扰三维细胞培养的内生(ingrowth)不足的限制,从而可以真正用来培养工程***(engineeredtissue),使之用于***、***研究及再生***、细胞疗法。
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