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发布时间:2020-09-29 10:00:11
旋转式细胞培养系统(以下简称RCCS)生物反应器是如何工作的?
RCCS生物器是由中心的一个同轴氧合器以及一个水平旋转培养皿所构成的。当培养皿充满培养基并且旋转时,培养基像固体一样围着水平轴旋转。氧合器与容器壁以相同的角速度旋转。这些条件使得培养容器内产生层流和***小的剪切力。细胞由离心力,重力和科式力作用而成悬浮状态,因此在RCCS生物反应器的细胞受到***的机械应力和高通量运输(营养物质,氧气等)因而能聚集形成类***聚合物。气体传输通过硅树脂氧合器传输,从而避免气泡的形成和湍流。
莱斯大学生物工程系的副Robert Raphael认为:“这种方法的美就在于它利用天然的细胞间相互作用来驱动三维结构的形成。此方法相当简单,任何对开发、或再生***感兴趣的实验室都可以此作为三维细胞培养的起点。”
这种三维***培养有望应用在***研究上。M.D. Andersonai症中心的Wadih Arap表示:“对于ai症研究,磁场所产生的‘隐性支架’已经不再是单纯的细胞培养,而让它们更像真正的肿1瘤。我们下一步将应用这种磁性来探索肿1瘤成像和治1疗上的应用。”
RCCS三维细胞培养系统的应用?
1取材 在无菌环境下从机体取出某种***细胞(视实验目的而定),经过一定的处理(如消化分散细胞、分离等)后接入培养器血中,这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的***细胞的首1次培养称为原代培养。2培养 将取得的***细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。3冻存及复苏(可参阅后面有关章节)为了保存细胞,特别是不易获得的突变型细胞或细胞株,要将细胞冻存。冻存的温度一般用液氮的温度-196℃,将细胞收集至冻存管中加入含保护剂(一般为二甲亚砜或甘油)的培养基,以一定的冷却速度冻存,终保存于液氮中。在极低的温度下,细胞保存的时间几乎是无限的。复苏一般采用快融方法,即从液氮中取出冻存管后,立即放入37℃水中,使之在一分钟内迅速融解。然后将细胞转入培养器皿中进行培养。
RCCS-3D系统中细胞的生长
在微重力状态下细胞易于聚集,比在标准重力环境中产生更高的细胞密度Bamp;C。促进细胞间相互作用的原因是微重力使细胞粘附分子、细胞外基质蛋白和其各自的受体发生***特异性上调。微重力可能影响细胞骨架结构(微丝)和与蛋白质磷酸化作用有关的细胞内信号机制B@!C。细胞骨架有可能是感知微重力的主要位点之一,在单细胞水平,细胞骨架结构的改变可用来解释细胞内磷酸化作用级联反应途径的改变。
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