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发布时间:2020-10-12 03:27:02
除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外, 绝大部分细胞株(包括悬浮性细胞), 在解冻之后, 应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中, 待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。
1 品 名: RCCS‐4HD 重复使用三维细胞培养系统/***4转头,RCCS-3SCQ,每2只为一组,每组***控制
2 标 配: 主机座X1,控制器X1,说明书X1,培养容器4pcs(一次性及可重复用培养容器均可用)
3 说 明:
3.1 可重复是指培养容器除可以通过射线灭菌外,还可以通过高温、高压灭菌处理,且培养容器前端盖可以拆解打开,以便于获取培养产物及清洁、***;
3.2 适配一次性培养容器、可重复培养容器以及STLV培养容器等所有规格培养容器;
3.3 通过使用不同规格的培养容器,可实现各种细胞培养、***培养(含骨***)以及支架培养、微载体培养等;
3.4 同时多可培养4组样品,根据细胞生长不同需求,RCCS,可每两组***控制转速;
RCCS-3D具有的低剪切力可以促进细胞紧密附着,促进细胞间联系,通过特异性的细胞粘附分子促进细胞分化,保持高密度细胞培养的能力;可以直接影响***表达,或者间接促进细胞间信号的旁分泌自主分泌。这一过程可使聚集不被剪切力***而快速建立和增大。模拟微重力环境可以促进从多种正常的和转化细胞构建肉眼可见的、分化的、***样3D 结构(即***等同物或类器X官),研究范围包括病毒、人肿X瘤细胞和其它生物制品(如抗X体、抗原)。
细胞传代的一般方法?
开始细胞传代前,仔细检查细胞传代所需的仪器和***是否齐全:一般主要有:细胞(单层细胞,镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH 培养液或MEM 培养液或199 等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血X清、庆大溶液(1 万单位)、7.5%NaHC03 溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS 洗液。
用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1)、细胞吹打管(20 ml)(以上用具需经121℃至
少15 分钟高压灭菌)、C02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、—20℃冰箱
操作步骤:镜检细胞,挑选生长状态良好,细胞界限清晰,RCCS-SC,具有立体感,形态好无污染、无异常及可X疑病变细胞。配制细胞培养液:按以下配比配制MEM-0.2%LH 培养液100ml 内,加入灭活小牛血X清10m1,庆大溶液0.3m1,7.5%碳酸氢钠溶液3ml。(仅供一般参考)。消化细胞;先用PBS 洗液冲洗细胞表面1-2 次,每次10m1,弃去洗液,向细胞瓶内加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,细胞瓶平放,RCCS-2SCQ,使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1 细胞培养液吹打分散细胞,按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中,再加入10m1 细胞培养液重复吹打一次后分装,然后补加至所需培养量。加塞,置于37±1℃孵箱培养。约2~4 天成片。(由细胞接种浓度决定);填写传代记录。
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